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數(shù)字放射自顯影系統(tǒng)的正確操作步驟

更新時(shí)間:2022-08-10瀏覽:1023次
  數(shù)字放射自顯影系統(tǒng)主要用于對(duì)標(biāo)記化合物的分布和動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行追蹤。放射自顯影也是基因定位的一種重要手段,即所謂的原位雜交技術(shù)。RNA與為其編碼的DNA順序(基因)在分子水平上具有堿基配對(duì)的互補(bǔ)關(guān)系,因而可以互相結(jié)合,形成DNA-RNA分子雜交體。
 
  如果把帶有放射性標(biāo)記的RNA與細(xì)胞切片相互作用,RNA即可結(jié)合到染色體中與其互補(bǔ)的DNA片斷上,把這種切片經(jīng)放射自顯影處理,即顯示出了該RNA基因存在的具體染色體部位,為遺傳學(xué)和基因工程提供有價(jià)值的資料。
 
  數(shù)字放射自顯影系統(tǒng)正確操作步驟:
 
  1、使用前先制備放射性同位素標(biāo)記的化合物,通常是選用發(fā)射低能β射線的同位素,如14C、3H等。
 
  2、使標(biāo)記化合物被生物組織或細(xì)胞吸收,參加生物代謝。
 
  3、把含有標(biāo)記化合物的組織做成切片,置于載片上,再把切片表面上涂一薄層乳膠,在暗盒中放置一定時(shí)間,進(jìn)行放射性“暴光”,然后按處理照像底片過(guò)程,經(jīng)顯影、定影,顯示出被射線還原的銀粒子。
 
  由于切片中放射性化合物在位置上與銀粒子沉淀吻合,因而銀粒子可指示出放射性化合物存在的部位。有時(shí)還可對(duì)切片再進(jìn)行染色處理,以使標(biāo)記部位顯示明確。
 
  放射自顯影可制做用于光學(xué)顯微鏡觀察的標(biāo)本,也可制做供電子顯微鏡觀察的標(biāo)本,其分辨力約為0.1μm。放射自顯影標(biāo)本處理過(guò)程,自涂乳膠步驟開始要在嚴(yán)密的暗室中進(jìn)行,以免受自然光的干擾,增加本底,降低自顯影效果。

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