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光片掃描顯微鏡和熒光探針的應(yīng)用

更新時(shí)間:2022-02-22瀏覽:1158次
  光片掃描顯微鏡不是簡(jiǎn)單成像的顯微鏡,而是可以用于在原子、分子尺度進(jìn)行加工和操作的工具。掃描探針顯微鏡的應(yīng)用領(lǐng)域是寬廣的,無論是物理、化學(xué)、生物、醫(yī)學(xué)等基礎(chǔ)學(xué)科,還是材料、微電子等應(yīng)用學(xué)科都有用武之地。
 
  光片掃描顯微鏡的基本原理是基于量子隧道效應(yīng)。當(dāng)針尖和試樣面間距離足夠小時(shí)(<0.4nm),在針尖和試樣面間施加一偏置電壓,便會(huì)產(chǎn)生隧道效應(yīng),電子在針尖和試樣面之間流動(dòng),形成隧道電流。
 
  鈣比率探針在溶液中均有熒光,測(cè)量時(shí)須洗去細(xì)胞外液探針,而進(jìn)入細(xì)胞后的探針其AM被分解后不能透出質(zhì)膜。由于這些探針要用紫外激發(fā)光作激發(fā)光源,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,還會(huì)增加潛在的自發(fā)熒光,而且熒光發(fā)射峰波長(zhǎng)也較短,須提高發(fā)光強(qiáng)度,因而其使用受到一定的限制。
 
  膜電位熒光探針根據(jù)其對(duì)膜電位變化反應(yīng)速度的快慢分為快、慢兩類探針,各類均有10多種。DiBAC4(3)為常用的膜電位熒光探針,DiBAC4(3)為帶負(fù)電荷的陰離子慢反應(yīng)染料。該探針本身無熒光,當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞與胞漿內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合后才發(fā)出熒光,測(cè)量時(shí)要求細(xì)胞浸在熒光染料中。
 
  細(xì)胞內(nèi)活性氧基活性氧可影響細(xì)胞代謝,與蛋白質(zhì)、核酸、脂類等發(fā)生反應(yīng),有些反應(yīng)是有害的,因此測(cè)量活性氧在毒理學(xué)研究中有一定的意義。根據(jù)檢測(cè)活性氧的不同可選擇不同的熒光探針。
 
  由于某些毒性物質(zhì)尤其是促癌物可影響縫隙連接介導(dǎo)的物質(zhì)運(yùn)輸,因此該方法也可用于鑒別對(duì)縫隙連接作用有潛在毒性的化學(xué)物質(zhì)。

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